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微生物实验室倒皿的注意事项

作者:中国培养基网来源:青岛日水生物技术有限公司官网 日期:2018-11-26 10:48
倒皿的注意事项
 
微生物培养中几种实验操作的注意事项:
 
倒平板:培养基灭菌后,需冷却至50摄氏度左右时才能倒平板。左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开。整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。平板冷却后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基(解决培养基的冷凝水问题),造成污染。若倒平板时,培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板应丢弃。
在培养基还热着流动性很好时就倒,要不容易到不匀。培养基不要太薄也不要太厚。还有倒完以后冷却过程中要放平。整个过程需要无菌。倒平板图片
倒平板操作:将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约 10到20毫升 )倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。等待平板冷却凝固(大约需 5到10分钟)后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。
日水生物培养皿图片
平板划线操作:第一次划线及每次划线之前都要灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环。第一次灼烧避免接种环上可能存在的微生物污染微生物培养基。每次划线之前灼烧,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线末端。画线结束,杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线用力要大小适当,防止用力过大将微生物培养基划破。
平板划线操作:将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红;在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞;将试管口通过火焰;将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液;将试管口通过火焰,并塞上棉塞;左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。注意不要划破微生物培养基。灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作,在三区域内划线。注意不要将最后一区域的划线与第一区相连。将平板倒置,放入培养箱中培养。
稀释涂布平板,稀释操作时:每支试管及其中9毫升水、移液管均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1-2cm处。涂布平板时:涂布器用70%酒精消毒,取出时,多余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。酒精灯与培养皿距离要合适,移液管头不要接触任何物体。
 
涂布平板操作:将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;取少量菌液(不超过 0.1毫升) ,滴加到微生物培养基表面;将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却 8到10秒;用涂布器将菌液均匀地涂布在微生物培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。注意:将涂布器末端浸在盛有体积分数为 70%的酒精的烧杯中。取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。
来自:青岛日水生物

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